Efisiensi Transformasi RNAi gen pfp ke dalam Kalus Saccharum officinarum Varietas PS 862 dengan Perantara Agrobacterium tumefaciens

Anis Fidiah Astutik, 081214153003 (2014) Efisiensi Transformasi RNAi gen pfp ke dalam Kalus Saccharum officinarum Varietas PS 862 dengan Perantara Agrobacterium tumefaciens. Thesis thesis, UNIVERSITAS AIRLANGGA.

[img]
Preview
Text (ABSTRAK)
gdlhub-gdl-s2-2014-astutikani-32898-4.intis-i.pdf

Download (199kB) | Preview
[img] Text (FULL TEXT)
gdlhub-gdl-s2-2014-astutikani-32898-full text.pdf
Restricted to Registered users only

Download (1MB) | Request a copy
Official URL: http://lib.unair.ac.id

Abstract

Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui pengaruh umur kalus terhadap efisiensi transformasi yang diperantarai A. tumefaciens pada tebu var. PS 862. Transformasi dilakukan dengan mentransfer konstruk RNAi gen pfp ke dalam genom tebu yang juga membawa gen penanda nptII (neomycin phosphotransferase II, resisten terhadap kanamisin) dengan perantara A. tumefaciens. Kalus tebu var. PS 862 umur 7 dan 10 minggu digunakan sebagai sumber eksplan. Kalus diinfeksi dengan suspensi A. tumefaciens pada OD600= 0,8 dan dikokultivasi pada medium MS yang mengandung 100 μM asetosiringon selama 3 hari. Setelah kokultivasi, kalus dipindah ke dalam media MS yang mengandung 500 mg/L sefotaksim dan diinkubasi selama 10 hari. Seleksi kalus transforman dilakukan pada media seleksi (media MS yang mengandung 100 mg/L kanamisin) selama 6 minggu, kemudian dipindah ke dalam media regenerasi (media MS+2 mg/L IAA+100 mg/L glutamin). Jumlah kalus hasil transformasi yang mampu beregenerasi membentuk planlet dalam medium seleksi digunakan untuk menentukan efisiensi transformasi. Keberadaan dan integrasi RNAi gen pfp ke dalam genom tebu dikonfirmasi dengan menggunakan PCR. Hasil penelitian menunjukkan bahwa efisiensi transformasi tertinggi diperoleh pada kalus tebu var. PS 862 umur 7 minggu sebesar 7,7% dan berdasarkan hasil analisis PCR diperoleh tiga tanaman tebu var. PS 862 yang positif mengandung RNAi gen pfp dengan ukuran pita DNA 1,110 pb.

Item Type: Thesis (Thesis)
Additional Information: KKC KK TB. 08-14 Ast e
Uncontrolled Keywords: calli age, A. tumefaciens, pfp gene RNAi, nptII (neomycin phosphotransferase II), transformation efficiency
Subjects: Q Science > QH Natural history > QH301 Biology
Q Science > QH Natural history > QH426 Genetics
Q Science > QK Botany > QK1-989 Botany
Q Science > QR Microbiology > QR75-99.5 Bacteria
Divisions: 08. Fakultas Sains dan Teknologi > Program Studi Biologi (S2)
Creators:
CreatorsEmail
Anis Fidiah Astutik, 081214153003UNSPECIFIED
Contributors:
ContributionNameEmail
ContributorY. Sri Wulan Manuhara, Dr., M.SiUNSPECIFIED
ContributorEdy Setiti Wida Utami, Dr., M.SUNSPECIFIED
Depositing User: Nn Duwi Prebriyuwati
Last Modified: 02 Sep 2016 08:05
URI: http://repository.unair.ac.id/id/eprint/38777
Sosial Share:

Actions (login required)

View Item View Item