Wurlina, - and Widayat Sastrowardoyo, - and Sunarni Zakaria, - and Dewa Ketut Meles, - (2008) Peranan Caspase 3 (Caspase Executor) Penyebab Apoptosis Sel Kanker Uterus Yang Terinduksi Alkaloid Achyranthes Aspera Linn Secara Invitro. Laporan Penelitian. LEMBAGA PENELITIAN, Surabaya. (Unpublished)

Text 2022_03_24_10_30_19.pdf Download (3MB)

Abstract

Penelitian ini dilakukan dengan tujuan untuk membuktikan fraksi alkaloid Achyranthes aspera linn berpengaruh terhadap viabilitas sel mieloma, induksi apoptosis dan jumlah sel mieloma yang mengalami nekrosis, menentukan konsentrasi fraksi alkaloid Achyranthes aspera linn yang menyebabkan kematian 50% sel mieloma (LC50) dan mengukur Optical Density Caspase menggunakan Elisa. Penelitian ini menggunakan fraksi alkaloid daun Achyranthes aspera linn yang dibuat dengan metode fraksinasi alkaloid berdasarkan farmakope Indonesia yang mengacu pada pembuatan sediaan obat berasal dari tanaman (Harbone, 1987). Proses pemisahan bahan dilakukan di laboratorium Fitokimia Fakultas Farmasi Universitas Airlangga. Hasil dari proses fraksinasi alkaloid Achyranthes aspera linn dilakukan ujicoba secara in vitro pada pertumbuhan sel mieloma yang bertindak sebagai set kanker dengan design penelitian acak lengkap, sebagai berikut : pada penelitian ini menggunakan 3 kelompok sel mieloma yakni kelompok 1 sebagai kelompok uji, kelompok 2 sebagai kontrol negatif dan kelompok 3 sebagai kontrol positif. Pada kelompok 1 masing-masing mendapatkan larutan uji dengan konsentrasi fraksi alkaloid Achyranthes aspera inn berbeda-beda yakni 1 ppm, 10 ppm, 100 ppm dan 1000 ppm. Pada kelompok 2 sebagai kelompok kontrol negatif hanya diberi media RPM I saja untuk mengetahui bahwa media tidak bersifat sitotoksik. Sedangkan kelompok 3 sebagai kelompok kontrol positif menggunakan obat standar yang dipakai untuk pengobatan kanker yakni colchicin dengan konsentrasi 100 ppm. Masing-masing kelompok diwakili oleh 8 lubang microwell plate sehingga pada percobaan ini dipakai 48 lubang microwell plate. Ketiga kelompok perlakuan dilakukan 8 kali replikasi. Parameter yang diamati pada penelitian ini adalah : 1) viabilitas sel mieloma, 2) jumlah sel mieloma yang mengalami apoptosis, 3) jumlah sel mieloma yang mengalami nekrosis, 4) konsentrasi fraksi alkaloid yang dapat membunuh 50% sel mieloma (LC50) dan mengukur Optical Density Caspase menggunakan Elisa. Hasil penelitian adalah sebagai berikut viabilitas sel mieloma pada kelompok perlakuan 1 = 30,42 :t 3,58%; kelompok perlakuan 2 = 26,19 :t 3,99%; perlakuan 3 = 9,45.:!: 4,82% dan perlakuan 4 = 7,26 + 7,26%. Kontrol positif = 13,18:t 7,75% dan kontrol negatif = 94,38:t 2,59%. Prosentase seI mieloma yang mengalami nekrosis pada kelompok P1= 54,33:t 7,65%; kelompok P2= 54,05 :t . 6,29%; kelompok P3= 53,03.:t 2,42%; kelompok P4= 57,81 + 1,47%; kelompok kontrol positif= 55,40 ! 4.23%; dan kelompok kontrol negatif 5,08 ! 0,68%. Prosentase sel mieloma yang mengalami apoptosis pada kelompok P1 = 15,23 ! 4,16%; kelompok P2= 19.75 ! 3.59%; kelompok P3= 37,52 ± 3,67%; kelompok P4= 34.93 ± 3,41%; kelon,pok kontrol positif= 31,41 ! 5,96%; dan kelompok kontrol negatif 0,54 ± 0,07%. Konsentrasi fraksi alkaloid Achyranthes aspera linn yang dapat membunuh 50% sel mieloma (Le50) secara in vitro sebesar 0,719 ppm. Berdasartkan uji ELISA, optical density Caspase mulai terlihat pada pemberian fraksi alkaloid Achyranthes aspera linn dosis 10 ppm (besar caspase > 2xCOV). Dari hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa alkaloid Achyranthes aspera linn menyebabkan kematian sel mieloma. Mekanisme kematian sel myeloma terjadi melalui proses nekrosis dan apoptosis dan semakin besar oosis fraksi alkaloid Achyranthes aspera linn semakin besar pula optical density caspase.

Actions (login required)

View Item