M. Anam AI-Arif, - (2007) Kloning Gen Penyandi Selulase Asal Keong Emas Melalui Transforman Pichia pastoris Guna Produksi Ensim Rekombinan. Laporan Penelitian. UNIVERSITAS AIRLANGGA, SURABAYA. (Unpublished)

Text (METODE PENELITIAN) 2022_03_28_10_48_46.pdf Download (2MB)

Abstract

Penelitian ini secara keseluruhan bertujuan untuk membakukan suatu probiotik peneema serat kasar untuk meningkatkan kecemaan jerami padi sebelum diberikan kepada temak ruminansia. Pada tahap pertaIna penelitian dimaksudkan untuk mendapatkan gambaran RNA dari saluran pencemaan keong emas (Pomacea canaliculala) serta untuk mengetahui hasil amplifikasi DNA ensim selulase. Pada tahap kedua dimaksudkan untuk mengetahui gambaran sekuen nukleotida genselulase, mentransfonnasikan gen tersebut ke Pichia pastoris serta mengetahui ekspresi gen tersebut menggunakan SDS-PAGE dan Western Blot. Jaringan peneemaan keong emas (Pomacea canaliculata) digerus dan dilakukan isolasi RNA total menggunakan reagen Trizol-LS, sintesis eDNA dengan menggunakan ready-to-go reverse !ranscriptase polymerase chain reaction (RTGRT -PCR) kit dan amplifikasi DNA menggunakan RTG-PCR kit. Hasil PCR kemudian di running dengan elektroforesis DNA. Dari penelitian ini didapatkan gambaran RNA dari sel-sel pada saluran pencemaan keong emas (Pomacea cana!icu!ata) yaitu 28 S dan 18 S. Hasil amplifikasi DNA ensim selulase menunjukkan panjang nukleotida 640 bp. Pada tahap kedua, produk PCR dimumikan menggunakan gen cleaned kill, kemudian dilakukan sekuensing nukleotida menggunakan ready reaction kilt dan Big dye terminator leitt (Applied Biosystems). Pada tahap ini didapatkan sekuen nukleotida dengan panjang potongan atas 349 - 3S 1 bp, namun setelah dilakukan alignment temyata tidak didapatkan kemiripan dengan gen selulase hasil temuan Imjongjirak dick. Untuk itu perlu dilakukan desain primer yang baru.

Actions (login required)

View Item