Djoko Agus Purwanto, - and Riesta Primaharinastiti, - and Febri Annuryanti, - (2011) Optimasi Metode Penetapan Kadar Metabolit Benzena Dalam Urin Menggunakan High Performance Liquid Chroma Tography (HPLC). Laporan Penelitian. UNIVERSITAS AIRLANGGA, SURABAYA. (Unpublished)

Text KKB LP 17 12 Pur o.pdf Download (1MB)

Abstract

Penelitian diawali dengan mengembangkan metode HPLC agar dapat digunakan untuk analisis metabolit benzena dalam sampel urin manusia. Metode yang dikembangkan kemudian divalidasi untuk membuktikan bahwa metode tersebut reliable dan reproducible. Setelah tervalidasi, metode diaplikasikan dalam sam pel urin manusia yang terpapar dengan benzena. Biomarker yang digunakan dalam sampel ini adalah s-phenylmercapturic acid atau SPMA. Proses analisis diawali dengan tahap preparasi sampel yang melibatkan ekstraksi cair-cair. Pelarut pengekstraksi yang digunakan adalah etil asetat sebanyak 3,0 ml dan ekstraksi dilakukan 2 kali. Optimasi kondisi kromatografi dilakukan untuk memperoleh kondisi kromatografi yang dapat memisahkan analit SPMA dari internal standar asam benzoat atau komponen lain yang mungkin terdapat dalam sampel urin. Dari tahap optimasi diperoleh bahwa dengan kolom Hypersil ODS (4,0 x 125 x 5~m) pada suhu kolom 25°C dan panjang gelombang deteksi 205 nm, pemisahan optimal diperoleh dengan menggunakan eluasi system gradien. Validasi metode analisis merupakan tahap penting dalam suatu proses anal isis karena bertujuan untuk membuktikan bahwa metode analisis yang dikembangkan telah memenuhi persyaratan untuk penggunaannya. Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan metode analisis HPLC untuk analisis SPMA dalam urin telah memenuhi persyaratan validasi metode analisis. Linieritas ditunjukkan dari persamaan regresi y = 23,96x - 0,002 dengan koefisien regresi r = 0,994. Sedangkan perolehan kembali dengan metode tersebut adalah 88,34- 117,16% dengan rerata 102,82% dan KV =10,37%.

Actions (login required)

View Item