Ani Tri Kumalawati, 080112396 (2005) PENENTUAN AKTIVITAS ENZIM-ENZIM XILANOLITIK REKOMBINAN DARI E. coli DH-5α (pTP510) PADA BERBAGAI LOKASI ENZIM. Skripsi thesis, UNIVERSITAS AIRLANGGA.

Preview	Text (ABSTRAK) gdlhub-gdl-s1-2006-kumalawati-2173-kkckkm-k.pdf Download (366kB) | Preview
Preview	Text (FULL TEXT) gdlhub-gdl-s1-2006-kumalawati-2173-mpk48_0-p.pdf Download (2MB) | Preview

Abstract

Penelitian ini bertujuan untuk menentukan waktu optimum produksi dan lokasi sekresi enzim xilanolitik rekombinan dari E. coil DH-5α (pTP510). Penentuan waktu optimum produksi enzim xilanolitik rekombinan dari E. coil DH-5α rekombinan dilakukan dengan membuat kurva pertumbuhan yaitu dengan cara menginkubasi kultur bakteri E. coli DH-5α rekombinan dalam alat penggoyang pada suhu 37°C dengan kecepatan 150 rpm selama 24 jam. Setiap interval waktu 4 jam kultur bakteri diambil secara aseptik dan diukur optical density-nya pada panjang gelombang 600 nm menggunakan spektrofotometer Shimadzu UV 1700 Pharma. Sel bakteri dilisis untuk mendapatkan enzim intraseluler dan ditentukan aktivitasnya menggunakan metode DNS. Penentuan lokasi sekresi enzim xilanolitik rekombinan dilakukan dengan mengisolasi enzim pada waktu optimum produksi. Lokasi yang ditentukan adalah lapisan ekstraseluler, intraseluler dan periplasmik dari E. coli DH-5α rekombinan. Aktivitas enzim xilanolitik rekombinan pada berbagai lokasi ditentukan dengan menguji enzim terhadap substrat turunan p-nitrofenol yaitu p-nitrofenil-β-D-xilopiranosida dan p-nitrofenil-α-L-arabinofuranosida. Satu unit aktivitas enzim didefinisikan sebagai banyaknya enzim yang diperlukan untuk membentuk 1 µmol produk per satuan waktu. Dari hasil penelitian diketahui bahwa waktu optimum produksi enzim xilanolitik rekombinan dari E. coil DH-5α rekombinan adalah 24 jam dengan aktivitas enzim xilanolitik tertinggi yaitu 0,1486 Unit/mL. Pada penentuan lokasi sekresi enzim, lokasi intraseluler menunjukkan aktivitas enzim xilanolitik rekombinan tertinggi dalam E. coli DH-5α rekombinan dengan aktivitas enzim xilosidase rekombinan tertinggi adalah 0,1256 Unit/mL dan aktivitas enzim arabinofuranosidase rekombinan tertinggi adalah 0,8080 Unit/mL.

Actions (login required)

View Item