Anis Fidiah Astutik, 081214153003 (2014) Efisiensi Transformasi RNAi gen pfp ke dalam Kalus Saccharum officinarum Varietas PS 862 dengan Perantara Agrobacterium tumefaciens. Thesis thesis, UNIVERSITAS AIRLANGGA.

Preview	Text (ABSTRAK) gdlhub-gdl-s2-2014-astutikani-32898-4.intis-i.pdf Download (199kB) | Preview
	Text (FULL TEXT) gdlhub-gdl-s2-2014-astutikani-32898-full text.pdf Restricted to Registered users only Download (1MB) | Request a copy

Abstract

Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui pengaruh umur kalus terhadap efisiensi transformasi yang diperantarai A. tumefaciens pada tebu var. PS 862. Transformasi dilakukan dengan mentransfer konstruk RNAi gen pfp ke dalam genom tebu yang juga membawa gen penanda nptII (neomycin phosphotransferase II, resisten terhadap kanamisin) dengan perantara A. tumefaciens. Kalus tebu var. PS 862 umur 7 dan 10 minggu digunakan sebagai sumber eksplan. Kalus diinfeksi dengan suspensi A. tumefaciens pada OD600= 0,8 dan dikokultivasi pada medium MS yang mengandung 100 μM asetosiringon selama 3 hari. Setelah kokultivasi, kalus dipindah ke dalam media MS yang mengandung 500 mg/L sefotaksim dan diinkubasi selama 10 hari. Seleksi kalus transforman dilakukan pada media seleksi (media MS yang mengandung 100 mg/L kanamisin) selama 6 minggu, kemudian dipindah ke dalam media regenerasi (media MS+2 mg/L IAA+100 mg/L glutamin). Jumlah kalus hasil transformasi yang mampu beregenerasi membentuk planlet dalam medium seleksi digunakan untuk menentukan efisiensi transformasi. Keberadaan dan integrasi RNAi gen pfp ke dalam genom tebu dikonfirmasi dengan menggunakan PCR. Hasil penelitian menunjukkan bahwa efisiensi transformasi tertinggi diperoleh pada kalus tebu var. PS 862 umur 7 minggu sebesar 7,7% dan berdasarkan hasil analisis PCR diperoleh tiga tanaman tebu var. PS 862 yang positif mengandung RNAi gen pfp dengan ukuran pita DNA 1,110 pb.

Actions (login required)

View Item