MAMIK DAMAYANTI, 081714253005 (2019) EKSPRESI, PEMURNIAN & KARAKTERISASI ENDO 1,4-β-XILANASE REKOMBINAN DALAM SISTEM EKSPRESI Escherichia coli BL21/pLATE31. Thesis thesis, Universitas Airlangga.

	Text abstrak.pdf Download (86kB)
	Text daftar isi.pdf Download (58kB)
	Text daftar pustaka.pdf Download (121kB)
	Text full text.pdf Restricted to Registered users only until 14 October 2022. Download (2MB) | Request a copy

Abstract

Endo 1,4-β-xilanase (EC 3.2.1.8) menghidrolisis ikatan 1,4 pada tulang punggung xilan, menghasilkan xilooligomer. Penelitian ini bertujuan mengekspresikan BsXyn di dalam sistem ekspresi E. coli BL21/pLATE31, mengukur tingkat kemurnian BsXyn, menentukan karakteristik BsXyn, menentukan spesifitas BsXyn terhadap substrat kromogenik, komersial dan alam serta mengidentifikasi profil produk hidrolisis dari substrat beechwood xylan oleh BsXyn. BsXyn mempunyai masa molekul realtif 21,23 kDa berhasil dimurnikan dengan menggunakan kromatografi afinitas Ni2+. Nilai parameter kinetika ditentukan dengan cara mengukur aktivitas hidrolisis BsXyn terhadap substrat oat spelt xylan dan beechwood xylan pada kondisi steady state dengan menggunakan metode DNS. Hasil penelitian menunjukkan bahwa BsXyn memiliki pH optimum 6.0 dan suhu optimum 50°C. BsXyn stabil pada suhu 50°C selama 6 jam, suhu 70°C selama 2,5 jam dan suhu 80°C selama 1 jam dan memiliki kisaran pH 4-10. BsXyn terhadap substrat sintesis pNP-A menghasilkan 120,6x103 U mL-1. Kinetika BsXyn terhadap oat spelt xylan menunjukkan nilai KM, Vmax, kcat and kcat/KM masing-masing 33,47456x104 μM, 4,7619x102 μM menit-1, 5,76501x103 menit-1 dan 1,72x10-2 menit-1 μM-1 sedangkan kinetika BsXyn terhadap beechwood xylan menunjukkan nilai KM, Vmax, kcat and kcat/KM masing-masing 41,8666x104 μM, 5,5555x102 μM menit-1, 6,7257x103 menit-1 dan 1,60x10-2 menit-1 μM-1. Analisis produk hidrolisis beechwood xylan oleh BsXyn menggunakan HPLC adalah xilooligosakarida dan arabinosa. Produk arabinosa yang dihasilkan menunjukkan keunikan BsXyn dan diasumsikan sebagai bifunctional xylanase/arabinofuranosidase. BsXyn menghidrolisis substrat biomassa dengan menunjukkan nilai aktivitas terhadap eceng gondok, jerami padi, tongkol jagung, ampas tebu dan kelapa sawit masing-masing 1.7635x103 U mL-1, 1.6771x103 U mL-1, 1.5492x103 U mL-1, 0.9589x103 U mL-1 and 1.4063x103 U mL-1.

Actions (login required)

View Item