AISYAH PRATIWI ARIMURTI, 081511533059 (2019) OPTIMALISASI AMPLIFIKASI PCR UNTUK ISOLASI GEN FUSI cbm-lcc2 DARI pET30a REKOMBINAN. Skripsi thesis, UNIVERSITAS AIRLANGGA.

	Text MPK. 87-19 Ari o abstrak.pdf Download (135kB)
	Text MPK. 87-19 Ari o daftar isi.pdf Download (312kB)
	Text MPK. 87-19 Ari o daftar pustaka.pdf Download (163kB)
	Text (FULLTEXT) MPK. 87-19 Ari o.pdf Restricted to Registered users only until 21 October 2022. Download (1MB) | Request a copy

Abstract

Lakase merupakan enzim yang mengkatalis degradasi lignin dengan cara oksidasi. Carbohydrate Binding Module (CBM) merupakan komponen penting dalam sisi aktif enzim yang dapat meningkatkan aktivitas enzim. Gen cbm-lcc2 telah terinsersi pada plasmid pET30a dan diekspresikan Escherichia coli BL21. Namun, masih diperlukan optimalisasi untuk ekspresinya. Penelitian ini bertujuan untuk mengoptimalisasi isolasi dan amplifikasi gen cbm-lcc2 dari pET30a dalam Escherichia coli TOP10 sebagai langkah awal proses subkloning. DNA template yang digunakan pada penelitian ini adalah pET30a-cbm-lcc2. Metode isolasi meliputi metode Polymerase Chain Reaction (PCR), pemurnian dan sekuensing. Proses PCR dilakukan menggunakan enzim Taq Polimerase dan Pfu Polimerase. PCR dilakukan sebanyak 30-35 siklus pada kondisi denaturasi 95ºC, annealing 53-63ºC dan extension 72ºC. Amplikon PCR dianalasis dengan metode sekuensing untuk mengetahui bahwa gen cbm-lcc2 yang akan diklon ke dalam pET32a telah terisolasi dan memiliki tingkat homologi 99% gen cbm-lcc2 dari pET30a.

Actions (login required)

View Item