KARTIKA DWI ASNI PUTRI, 081511533022 (2019) TRANSFORMASI GEN PENYANDI CHIMERIC LACCASE DI Saccharomyces cerevisiae BJ1824. Skripsi thesis, UNIVERSITAS AIRLANGGA.

	Text ABSTRAK.pdf Download (46kB)
	Text DAFTAR ISI.pdf Download (56kB)
	Text DAFTAR PUSTAKA.pdf Download (57kB)
	Text (FULLTEXT) MPK 86 19 Put t.pdf Restricted to Registered users only until 21 October 2022. Download (1MB) | Request a copy

Abstract

Biobleaching merupakan proses degradasi lignin pada pulp dan kertas yang bersifat ramah lingkungan, salah satunya seperti enzim chimeric lakase. Lakase merupakan enzim yang memiliki kemampuan untuk bereaksi dengan sisi fenol dari polimer lignin. Pada penelitian ini digunakan gen lcc2 dari Pleurotus salmoneostramineus yang dimodifikasi dengan CBM-GbtXyl43B yang diisolasi dari Geobacillus thermoleovorans IT-08. CBM (Carbohydrate Binding Module) memiliki kemampuan untuk memediasi antara enzim dengan substrat agar pengikatannya lebih lama sehingga aktivitas katalitik enzim menjadi lebih optimal. Penelitian ini dimulai dengan identifikasi gen melalui PCR koloni dengan gen insert berukuran 2058 bp dan dilakukan restriksi secara single digest dengan hasil pita ukuran 8012 bp yang diduga sebagai pYHM1-(cbm-lcc2), linier. Gen ini selanju tersebut ditransformasikan pada Saccharomyces cerevisiae BJ1824 (MATa, ura3, leu3, his3, trip1, pep4-3) dengan metode Lithium Acetate dengan menggunakan media seleksi YNBD-U. Transforman yang tumbuh selanjutnya diekspresikan pada media produksi YNBG-U (Yeast Nitrogen Base Galactose – Uracil) dan YPG (Yeast Peptone Galactose). Sumber karbon yang digunakan ialah galaktosa karena pada plasmid pYHM1 digunakan promotor GAL1. Pada analisis SDS-PAGE, protein chimeric laccase berhasil terekspresikan dengan ukuran 80 kDa pada bagian ekstaseluler dan associated cell.

Actions (login required)

View Item