RISA YUNITA, - (2022) OPTIMASI EKSPRESI PROTEIN SPIKE MUTAN SARS-CoV-2 TERFUSI DENGAN GLUTATHIONE S-TRANSFERASE (GST). Skripsi thesis, UNIVERSITAS AIRLANGGA.

	Text (HAL JUDUL) HAL JUDUL.pdf Download (415kB)
	Text (BAB I) BAB I.pdf Download (42kB)
	Text (FULL TEXT) FULL TEXT.pdf Restricted to Registered users only Download (3MB) | Request a copy

Abstract

"ABSTRAK Protein spike telah dijadikan dasar dalam pengembangan antigen dan juga berbagai kit deteksi SARS-CoV-2. Sebelum dilakukan Produksi protein spike dilakukan proses design yaitu dengan dilakukannya mutasi pada D614G dan Q677H pada spike wild type. Hal ini dikarenakan kedua mutasi ini sangat berdampak pada proses pengenalan terhadap reseptor. Proses ekspresi pada E. coli BL21(DE3) memberikan keuntungan berupa produksi yang relatif murah, efisien dan mendapatkan hasil yang lebih banyak. Namun permasalahannya adalah protein rekombinan yang terbentuk dalam keadaan tidak terlarut (badan inklusi). Salah satu strategi yang digunakan untuk mengatasi ini adalah digunakan vektor pGEX-4T-1/Smut yang terfusi dengan GST pada N-terminal. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui apakah protein spike mutan SARS-CoV-2 rekombinan dapat diekspresikan pada fraksi terlarut dengan menggunakan GST di E. coli BL21(DE3) dan menentukan kondisi optimum ekspresi protein spike mutan SARS-CoV-2 rekombinan yang terfusi dengan GST pada E. coli BL21(DE3). Ekspresi protein dilakukan dengan optimasi terhadap suhu dan waktu induksi serta konsentrasi IPTG. Protein rekombinan spike mutan kemudian dilakukan analisis dengan menggunakan SDS-PAGE dan dilakukan pengukuran pita densitas secara semi kuantitatif dengan menggunakan perangkat lunak ImageJ. Protein Smut terlarut berhasil diekspresikan dengan kondisi optimum yaitu induksi 0,5 mM IPTG dengan suhu 20 oC overnight (16-18 jam). "

Actions (login required)

View Item