THESALINA MEITARA PANJAITAN, - (2022) Penyisipan Gen pncA Mycobacterium tuberculosis Penyandi Pirazinamidase Ke Dalam Vektor pET30a Untuk Preparasi Ekspresi Proteinnya. Skripsi thesis, UNIVERSITAS AIRLANGGA.

	Text (HAL JUDUL) HAL JUDUL.pdf Download (340kB)
	Text (BAB 1) BAB 1.pdf Download (45kB)
	Text (FULLTEXT) 081811533084.pdf Restricted to Registered users only Download (2MB) | Request a copy

Abstract

Penelitian ini bertujuan melakukan penyisipan gen pncA Mycobacterium tuberculosis ke dalam vektor pET30a untuk preparasi ekspresi proteinnya. Gen pncA disisipkan ke dalam vektor ekspresi pET30a DNA melalui proses transformasi E. coli TOP10. Karakterisasi pET30a-pncA rekombinan dilakukan melalui pemotongan dengan dua enzim restriksi yaitu BglII dan NdeI serta dilanjutkan dengan penentuan urutan nukleotida gen pncA dengan metode dideoxy-Sanger menggunakan primer T7 promotor dan T7 terminator kemudian hasil nukleotida yang terbaca dilakukan multiple sequence alignment menggunakan program DNASTAR : Seqman. Hasil penelitian menunjukkan bahwa gen pncA Mycobacterium tuberculosis dapat disisipkan kedalam vektor plasmid pET30a DNA. Restriksi pET30a-pncA dengan metode double digest menggunakan enzim restriksi BglII dan NdeI menghasilkan 2 fragmen berukuran ±5,4 kb sesuai ukuran pET30a DNA dan ±0,6 kb sesuai ukuran gen pncA. Sedangkan pemotongan tunggal plasmid pET30a-pncA masing-masing dengan BglII dan NdeI menghasilkan 1 fragmen berukuran ±6 kb. Gen pncA R2 memiliki 4 titik mutasi yakni, G76T; G112C; A403C; G419A yang menyebabkan kemungkinan struktur molekul proteinnya berubah sehingga menjadi resisten dengan PZA.

Actions (login required)

View Item