IKA YUNI SETYOWATI, 080112311 (2006) KONSTRUKSI PUSTAKA GENOM Arthrobacter sp 87 DAN DETEKSI TRANSFORMAN YANG MENGANDUNG GEN SISIPAN B7DEX. Skripsi thesis, UNIVERSITAS AIRLANGGA.

	Text (ABSTRAK) 32.pdf Download (172kB)
Preview	Text (FULL TEXT) gdlhub-gdl-s1-2006-setyowatii-2100-mpk39_05.pdf Download (2MB) | Preview

Abstract

Arthrobacter sp B7 merupakan bakteri yang menghasilkan dan mensekresi dekstranase dengan aktivitas potensial. Dekstranase digunakan dalam industri untuk menghilangkan dekstran dari gula tebu dan juga telah digunakan secara klinis untuk mengatasi plak gigi melalui degradasi glukan tak larut air yang dihasilkan oleh Streptococcus mutans. Konstruksi pustaka genom dilakukan dengan tujuan untuk memperoleh transforman positif, yaitu pBKS+ rekombinan yang mengandung gen sisipan B7DEX Pustaka genom Arthrobacter sp B7 dikonstruksi melalui proses ligasi antara plasmid pBKS+ dengan fragmen DNA kromosom Arthrobacter sp B7 hasil pemotongan parsial dengan enzim restriksi Sau3A. Transformasi DNA ke dalam sel inang E. coil DH5α dilakukan melalui pembuatan sel kompeten dan kejutan panas pada 42 °C selama 1 menit. Hasil proses ligasi dibuktikan dengan resistensi ampisilin dan terbentuknya koloni putih transforman E. coli DH5α pada media seleksi yang mengandung X gal dan IPTG. Deteksi adanya gen sisipan B7DEX dalam transforman ditentukan dengan keberadaan daerah bening (halo) di sekitar koloni positif yang disebabkan oleh hidrolisis dekstran biru oleh enzim dekstranase. Proses transformasi menghasilkan 1040 koloni putih dan deteksi transforman yang mengandung gen sisipan B7DEX baik dengan cara plating koloni putih ke media dekstran biru 2000R maupun dengan cara uji aktivitas enzim dekstranase belum berhasil mendapatkan koloni yang dikelilingi halo, yaitu koloni yang mengekspresikan gen dekstranase.

Actions (login required)

View Item