Y. Sri Wulan Manuhara,., 131801396 (2002) UJI KEBERHASILAN TRANSFORMASI GEN #946; 1,3- ENDOGLUCANASE KE DALAM TANAMAN KUBIS (Brassica oleracea var. Capitata L.) MENGGUNAKAN MEDIUM SELEKSI KANAMYCIN DAN METODE PCR. UNIVERSITAS AIRLANGGA, SURABAYA. (Unpublished)

Preview	Text (ABSTRAK) gdlhub-gdl-res-2007-manuharays-4252-lp52_07-k.pdf Download (350kB) | Preview
Preview	Text (FULLTEXT) gdlhub-gdl-res-2007-manuharays-4252-lp52_07.pdf Download (2MB) | Preview

Abstract

Karakterisasi tanaman setelah transformasi adalah langkah yang sangat penting untuk membuktikan keberhasilan transformasi, oleh karena itu diperlukan penerapan metode skrining populasi tanaman transgenik secara akurat. Metode seleksi kanamycin dan PCR (Polymerase Chain Reaction) adalah metode awal yang dapat digunakan untuk mengidentifikasi tanaman yang diduga membawa gen 13-1,3-endoglucanase yang ditransformasikan ke dalam tanaman kubis (Brassica oleracea var. capitata), karena gen 13-1,3-endoglucanase dibawa oleh vektor biner pROK 1 a-EG yang dilengkapi dengan gen nptII yang mengekspresikan enzim neomycin phosphotrnasferase untuk sifat ketahanan tanaman terhadap kanamycin. Sedangkan dengan metode PCR gen R-1,3-endoglucanase yang telah masuk ke dalam genom tanaman dapat diamplifikasi menggunakan primer untuk gen tersebut, sehingga hasil transformasi dapat dideteksi. Eksplan hipokotil kubis ditransformasi gen f3-1,3-endoglucanase dengan perantara Agrobacterium tumefaciens dan basil transformasi diseleksi pada medium yang mengandung kanamycin 50 mg/i. Eksplan yang mampu tumbuh dan berkembang menjadi planlet diduga adalah transforman. Kemudian planlet yang diduga transforman diuji menggunakan metode PCR. Dan 115 eksplan yang ditransformasi diperoleh 4 tunas kubis (3,4%) yang diduga transforman. Pertumbuhan dan perkembangan tunas kubis transforman tidak sempurna bila dibanding dengan planlet pads kontrol positif (eksplan tidak ditransformasi). Dan hasil uji PCR diperoleh 2 transforman yang positif PCR, berarti bahwa pads kedua transforman tersebut gen 13-1,3-endoglucanase telah tersisip ke dalam genom tanaman kubis.

Actions (login required)

View Item